Pytania i odpowiedzi

Inżynieria genetyczna

Zebrane pytania i odpowiedzi do zestawu.
Ilość pytań: 81 Rozwiązywany: 443 razy
Pytanie 1
Ktore z podanych niżej związków mogą być wykorzystane do znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu kinazy polinukleotydowej:
[γ(gama)-32P]-ATP
Pytanie 2
Które z podanych wektorów jest najmniej przydatny do sekwencjonowania genomu ssaczego ?
wektor plazmidowy
Pytanie 3
Rysunek wektora pGEM3Z i wskazać cechy prawdziwe:
może być użyty do otrzymywania ssDNA
może tworzyć dsRNA służy do transkrypcji in vitro i otrzymywania dsRNA do wyciszania genowego sond do hybrydyzacji
Pytanie 4
Pytanie na temat pożywki M9 :(jej charakterystyka
ma ściśle zdefiniowany skład
Pytanie 5
W celu otrzymania preparatu DNA plazmidowego z kom. bakteryjnej dodano NaOH w takiej ilosci iz wartosc pH wynosila 12.5 Ktory z opisow / charakterystyk jest prawdziwe
te co sie same zligowaly stanowia jedynie 1,2 % w porownaniu do eksperymentu kontrolnego gdzie nie było defosforylacji
Pytanie 6
Mamy opisany eksperyment restrykcji jakiegoś faga. Najpierw 16 µl DNA w probówce. Do tego dodajemy kolejno: 1. 2µl buforu 2. 2 µl roztworu z enzymem Pytanie: Skoro optymalne stężenie NaCl dla enzymu to 50mM to jakie było wyjściowe stężenie tej soli w dodawanym buforze
500mM
Pytanie 7
W trakcie elektroforezy w żelu agarozowym, w nieobecności bromku etydyny:
liniowe czasteczki dsDNA poruszaja sie tym szybciej im sa krotsze
fragmenty dsDNA o dlugosci 1006bp i 1007bp moga byc rozdzielone w celu preparatywnym
Pytanie 8
Dwie próbki kompetentnych komórek E.coli poddano transformacji wektorem zawierającym gen AmpR (opornosc na ampicyline). I potem mamy dwie różne sytuacje: 1. dodano do nich niewielka ilosc pozywki plynnej i po ok. 2 min umieszczono na pożywce zawierająca ampicylinę. 2. dodano ta sama ilosci pozywki plynnej i po 30 min inkubacji umieszczono na pożywce z ampicylina. Jakie zanotowano obserwacje:
szalka pierwsza 30 kolonii i szalka druga 400 kolonii
Pytanie 9
Fragmenty (ramiona - w sumie 30kb) WEKTORA ZASTĘPCZEGO poddawano ligacji z fragmentami DNA majacymi prawidlowe konce lepkie odpowiednie do ramion wektora. Jaki maksymalny rozmiar mogl mieć wsczepiany w ten wektor odcinek:
20kb
Pytanie 10
Doświadczenie ktorego celem jest nokaut genu mysiego XYZ. Komórki macierzyste, do których wprowadzany jest gen rekombinowany:
zawierają oba allele typu dzikiego
Pytanie 11
W pewnym laboratorium prowadzono badania, których celem było scharakteryzowanie aktywatora transkrypcji genu glukokinazy wątrobowej. W tym celu korzystając z odpowiedniej biblioteki sklonowano gen, z wysokim prawdopodobienstwem kodujący ten aktywator. W celu eksperymentalnego potwierdzenia, że otrzymany DNA rzeczywiście koduje aktywator posłużono się testem zilustrowanym na przedstawionym poniżej schemacie. W teście tym wykorzystano dwa plazmidy - jeden z nich zawierał gen kodujący aktywator, drugi gen reporterowy. Plazmidami tymi transfekowano odpowiednie komórki. Które z poniższych twierdzeń są prawdziwe w odniesieniu do testu zilustrowanego na schemacie
plazmid oznaczony numerem 2 zawiera gen reporterowy, a plazmid oznaczony numerem 1 gen kodujący aktywator
pojawienie się transkryptów genu reporterowego w komórce zalezy od oddziaływania produktu sklonowanego genu z elementem regulatorowym, kontrolującym transkrypcję genu reporterowego
Pytanie 12
Spośród podanych poniżej zestawów proszę wybrać zawierający najwłaściwsze uzupełnienia dla następującego twierdzenia: “ddNTP, używany do sekwencjonowania DNA metodą Sangera charakteryzuje się tym, że nie posiada on …....... przy węglach …..... i ”
OH, 2’, 3’
Pytanie 13
Jednym z etapów eksperymentu zmierzającego do izolacji nieznanego czynnika transkrypcji (represora XYZ) była chromatografia jonowymienna. W celu identyfikacji frakcji zwierających ten czynnik posłużono się techniką odcisku stopy z wykorzystaniem DNazy I (ang. Dnase I footprinting). Jako sondę użyto znakowany radioizotopowo fragment DNA zawierający sekwencje elementu regulatorowego specyficznie oddziałującego z represorem XYZ. Na rysunku poniżej przedstawiono wyniki analizy autoradiograficznej żelu poliakrylamidowego otrzymanego po wykonaniu DNase I footprinting dla 22 frakcji (od 1 do 22) jakie otrzymano po chromatografii. Na autoradiogramie widoczne są też inne kontrolne/ pomocnicze ślady. Na podstawie analizy autoradiogramu można przypuszczać, że:
represor jest z całą pewnością obecny we frakcjach od 9 do 12
ślad oznaczony literą O odpowiada preparatowi naniesionemu na kolumnę jonowymienną, czyli poddawanemu na niej rozdziałowi
ślad oznaczony literami FT to ślad kontrolny, który z całą pewnością nie zwiera represora XYZ
Pytanie 14
W celu wyznaczenia sekwencji 5’ końca transkryptu można posłużyć się metodą RACE. Kluczowym etapem RACE jest synteza polinukleotydu komplementarnego do transkryptu. Spośród enzymów/ odczynników podanych poniżej proszę wybrać te, które mogą być w tym celu użyteczne:
odwrotna transkryptaza
dNTP
krótki oligonukleotyd komplementarny do sekwencji genu kodującego transkrypt
oligo dT
Pytanie 15
Indukowane przez wirusa wyciszanie genów (virus induced gene silencing VIGS) to technika:
która pozwala określić funkcje genu na podstawie skutków/ zmian jakie powoduje degradacja jego transkryptu
Pytanie 16
Które z podanych poniżej informacji są prawdziwe w odniesieniu do eksperymentu pirosekwencjonowania DNA?
sekwencjonowanie tą metodą wymaga otrzymania ss DNA
podczas pirosekwencjonowania długość emisji światła (chemiluminescencji) resjtrowana po inkubacji z kolejnym dNTP, zależy od ilości uwolnionych cząsteczek pirofosforanu, a więc od ilości wbudowanych reszt.
Pytanie 17
Które z poniższych twierdzeń jest prawdziwe w odniesieniu do real- time PCR?
metoda ta pozwala na określenie ilości DNA w analizowanej próbce
metoda ta pozwala na określenie ilości transkryptów analizowanego genu- wymaga użycia na poczatku doświadczenia odwrotnej transkryptazy
ilość produktu powstającego podczas real- time PCR może być precyzyjnie określona przez pomiar fluorescencji związku kowalencyjnie przyłączonego do jednego z końców oligonukleotydu pełniącego funkcję specyficznej sondy wiążącej się z produktem amplifikacji
stosuje się sondę reporterową hybrydyzującą z produktem PCR
może służyć do oznaczenia stężenia RNA, jeśli na początku eksperymentu użyje się odwrotnej transkryptazy
Pytanie 18
Aby komórki E.Coli uległy transformacji cząsteczkami rekombinowanych plazmidów komórki te muszą być:
Kompetentne
Pytanie 19
Które z poniższych elementów są konieczne do przeprowadzenia ekspresji sekwencji kodującej genu eukariotycznego w komórce bakteryjnej:
sekwencja wiążąca rybosomy
silny i jednocześnie regulowany promotor prokariotyczny
prokariotyczna sekwencja terminacji transkrypcji
Pytanie 20
Jeżeli fragment sekwencji nici DNA, która podlega sekwencjonowaniu jest 5’-AAACCCGGGTTTAAACCCGGGTTT-3’, to sekwencja oligonukleotydu, który ma być użyty jako starter/primer powinna być:
5’-AAACCCGGGTTT-3’