Strona 1
Inżynieria genetyczna
Pytanie 1
Ktore z podanych niżej związków mogą być wykorzystane do znakowania fragmentu DNA przy wykorzystaniu kinazy polinukleotydowej:
[γ(gama)-32P]-ATP
dATP, znakowany 32P w pozycji γ (gama)
[α(alfa)-32P]-dATP
dATP, znakowany 32P w pozycji γ (gama)
dGTP , znakowany w pozycji α lub γ (alfa lub gama- obojętnie)
Pytanie 2
Które z podanych wektorów jest najmniej przydatny do sekwencjonowania genomu ssaczego ?
YAC
wektor będący pochodną faga
wektor plazmidowy
kosmid
BAC
Pytanie 3
Rysunek wektora pGEM3Z i wskazać cechy prawdziwe:
może tworzyć dsRNA służy do transkrypcji in vitro i otrzymywania dsRNA do wyciszania genowego sond do hybrydyzacji
jest kosmidem
ma gen markerowy do ekspresji genu w organizmie drożdżowym
może być użyty do otrzymywania ssDNA
Pytanie 4
Pytanie na temat pożywki M9 :(jej charakterystyka
ma ściśle zdefiniowany skład
zawiera tylko zwiazki organiczne
po dodaniu glukozy otrzymamy pozywke LB
zawiera ampicylinę
zawiera tylko zwiazki nieorganiczne
Pytanie 5
W celu otrzymania preparatu DNA plazmidowego z kom. bakteryjnej dodano NaOH w takiej ilosci iz wartosc pH wynosila 12.5 Ktory z opisow / charakterystyk jest prawdziwe
w komorkach nie bedzie aktywnosci enzymu XYZ
w tych warunkach caly dsDNA jaki znajdowal sie w komorce ulegl dysocjacji do pojedynczych nici
te co sie same zligowaly stanowia jedynie 1,2 % w porownaniu do eksperymentu kontrolnego gdzie nie było defosforylacji
Pytanie 6
Mamy opisany eksperyment restrykcji jakiegoś faga. Najpierw 16 µl DNA w probówce. Do tego dodajemy kolejno:
1. 2µl buforu
2. 2 µl roztworu z enzymem
Pytanie: Skoro optymalne stężenie NaCl dla enzymu to 50mM to jakie było wyjściowe stężenie tej soli w dodawanym buforze
10mM
50mM
500mM
trudno powiedziec bo za malo informacji
200mM
Pytanie 7
W trakcie elektroforezy w żelu agarozowym, w nieobecności bromku etydyny:
liniowe czasteczki dsDNA poruszaja sie tym szybciej im sa krotsze
czasteczkki dsDNA sa obdarzone ladunkiem dodatnim
czasteczka dsDNA porusza sie w kierunku elektrody ujemnej
fragmenty dsDNA o dlugosci 1006bp i 1007bp moga byc rozdzielone w celu preparatywnym
superzwiniete czasteczki dsDNA poruszaja sie wolniej niz odpowiednie im zlinearyzowane
Pytanie 8
Dwie próbki kompetentnych komórek E.coli poddano transformacji wektorem zawierającym gen AmpR (opornosc na ampicyline). I potem mamy dwie różne sytuacje:
1. dodano do nich niewielka ilosc pozywki plynnej i po ok. 2 min umieszczono na pożywce zawierająca ampicylinę.
2. dodano ta sama ilosci pozywki plynnej i po 30 min inkubacji umieszczono na pożywce z ampicylina.
Jakie zanotowano obserwacje:
szalka pierwsza 0 kolonii i szalka druga 300 kolonii
szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 30 kolonii
szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 0 kolonii
szalka pierwsza 30 kolonii i szalka druga 400 kolonii
szalka pierwsza 300 kolonii i szalka druga 300 kolonii