Strona 1
3. Poznawanie białek i proteomów
Pytanie 1
Czym jest aktywność katalityczna?
początkowa szybkość reakcji (V0), wyznaczana w optymalnych warunkach, przy wysycającym stężeniu substratu, wyrażająca ilość powstającego produktu (lub zużywanego substratu) w jednostce czasu w określonej temperaturze.
stosunek całkowitej aktywności na kolejnych etapach do całkowitej aktywności wyjściowej
stosunek aktywności specyficznej na kolejnych etapach do wyjściowej aktywności specyficznej
stosunek całkowitej aktywności enzymatycznej do całkowitej ilości białka w preparacie
Pytanie 2
Uszereguj kationy ze względu na wzrastająca siłę wysalającą
Li+ > Na+ > NH4+ > Mg2+ > Ca2+ > Sr2+ > Se2+ > Al2+ > Th3+
Th3+ > Al2+ > Se2+ > Sr2+ > Ca2+ > Mg2+ > NH4+ > Na+ > Li+
Pytanie 3
Czym jest wysalanie?
efekt zmniejszania się rozpuszczalności białek w stężonych roztworach soli
uszkodzenie trzeciorzędowej i czwartorzędowej struktury białka natywnego.
uszkodzenie pierwszorzedowej struktury białka natywnego.
efekt zwiększania się rozpuszczalności białek w stężonych roztworach soli
Pytanie 4
Który związek jest najczęściej stosowany do wysalania białka?
Pytanie 5
Od czego jest skrót SDS?
Pytanie 6
Które zdania na temat wirowania są prawdziwe?
Może służyć do oznaczania masy cząsteczkowej białek oraz ich gęstości
może zachodzić w rotorze uchylnym
Jest to metoda służąca do rozdzielania białek o różnym współczynniku sedymentacji
Im WIĘKSZA wartość S tym WOLNIEJ porusza się cząsteczka w polu wirowania
Można rozdzielić białka różniące się przynajmniej 2x współczynnikiem sedymentacji
Pytanie 7
Czym jest test ELISA?
W tej metodzie produkt (najczęściej barwny) można ocenić ilościowo metodą spektrofotometryczną, służącą do pomiaru intensywności barwy.
Służy do ilościowego oznaczania przeciwciała lub antygenu za pomocą specyficznych przeciwciał
Służy do rozdzielania białek o różnym współczynniku sedymentacji
Polega na kolejnym odszczepianiu wyznakowanych reszt aminokwasowych od końca aminowego peptydu
Umożliwia identyfikację konkretnego białka w preparacie białek rozdzielonych za pomocą elektroforezy
Pytanie 8
Jakie techniki detekcji są stosowane w technice Western blot?
autoradiografia - Przeciwciało drugorzędowe znakowane izotopowo
chemifluorescencja- produkt reakcji jest fluorescencyjny
immunogold - przeciwciało drugorzędowe jest znakowane złotem, sygnał jest wzmacniany przez „wysrebrzanie” oparte na zdolności metalicznego Au do redukcji Ag w obecności substancji redukującej (np. hydrochinonu)
bioluminescencja - podczas reakcji enzymatycznej emitowane jest światło (substratami są pochodne fluoresceiny)
Pytanie 9
Połącz w pary odczynnik z jego zastosowaniem
odwracalna denaturacja białka pozbawionego mostków dwusiarczkowych
Mocznik
Hydroliza wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt aminokwasów aromatycznych
Chymotrypsyna
Odwracalna denaturacja białka które ma mostki dwusiarczkowe
Mocznik oraz beta-merkaptoetanol
Oznaczanie sekwencji małego peptydu
Fenyloizotiocyjanian
Identyfikacja końcowej reszty aminowej peptydu (którego ilość nie przekracza 0,1ug)
Chlorek dansylu lub chlorek dabsylu
Hydroliza wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt lizyny i argininy
Trypsyna
Zerwanie wiązań peptydowych po karboksylowej stronie reszt metroninowych
CNBr